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VHH纳米抗体纯化应用案例
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产品名称:VHH纳米抗体纯化应用案例

纳米抗体(Nanobody, Nbs)是由比利时科学家于1993年在自然杂志中首次报道,是骆驼科动物(骆驼,大羊驼,羊驼及其近亲物种)缺失轻链的天然重链抗体的可变区(VHH)组成的单域抗体,该抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的CH2与CH3区,VHH晶体为2.5nm,长4nm,分子量只有15KD,内部存在二硫键,且表面有大量亲水残基,对热和PH值有较强的抵抗力,被称为“生物导弹”的治疗性抗体药物。
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简介


  纳米抗体(Nanobody, Nbs)是由比利时科学家于1993年在自然杂志中首次报道,是骆驼科动物(骆驼,大羊驼,羊驼及其近亲物种)缺失轻链的天然重链抗体的可变区(VHH)组成的单域抗体,该抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的CH2与CH3区,VHH晶体为2.5nm,长4nm,分子量只有15KD,内部存在二硫键,且表面有大量亲水残基,对热和PH值有较强的抵抗力,被称为“生物导弹”的治疗性抗体药物。
  纳米抗体(Nanobody)与传统抗体相比较,在结构上存在较大差异,所以其特性也表现不一样。纳米抗体具有相对分子质量小、人源化简单、亲和力高、稳定性高、可微生物表达、免疫原性低、穿透力强、可溶性好等优势。使其在基础医学研究以及疾病诊断和治疗方面具有广阔的应用前景。

 

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纯化工艺:


  与传统的lgG相比,与骆驼发现的单链抗体(HCAb)缺少轻链和重链CH1,只含有CH2、CH3和可变区。HCAb抗原绑定部分由重链可变区构成,通过对其组装改造,该双特异性的纳米抗体的相对分子质量为22~30 k 之间 。
  纳微采用两步离子纯化方法,阴离子流穿+阳离子结合模式,最终纯度达到95%以上,收率达到90%以上。

 

结果


  经第一步NanoGel-50Q流穿模式纯化后,从SDS-PAGE上分析,纯度提高至80%左右,26k左右的目的条带明显;第二步NanoGel-50SP结合模式纯化后,上下杂带基本去除,纯度提高至95%以上。

 

注:获得完整版信息,请联系我们

 

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