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纳微科技“超级”分子筛来了

纳微科技“超级”分子筛来了

  • 分类:资讯中心新
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  • 发布时间:2022-02-24 14:21
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【概要描述】

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关于分子筛层析

分子筛层析(size-exclusion chromatography ,SEC)也叫尺寸排阻层析,是一种通过样品溶液中各组分分子(尺寸)大小来达到分离目标组分的柱层析技术。SEC曾被称为凝胶渗透色谱(gel permeation chromatography,GPC)或者凝胶过滤色谱(gel filtration chromatography,GFC),两者的区别在于GPC的流动相主要为有机相,GFC的流动相为水溶液。就目前纯化领域从业人员习惯来看,提到分子筛层析,主要指生物大分子的层析纯化,而小分子纯化领域更习惯称之为凝胶渗透色谱或凝胶过滤色谱。

 

SEC过程中,样品分子通过不断在流动相和层析介质孔中的固定流动相之间扩散迁移,因受层析介质孔内扩散限制不同,小分子在层析介质中花费更多的时间,因此随流动相沿层析柱轴向迁移慢,相反,大分子花费更多的时间在层析介质中的大孔或层析介质颗粒之间的死体积中,随流动相迁移快,这样大小不同的分子在迁移过程中逐渐被分开。

SEC与其他的层析模式不同,样品分子在SEC过程中并不与层析介质结合(死吸附除外),因此流动相成分并不直接影响分离过程,分子筛层析介质的粒径和孔径,尤其是孔径大小在其分离纯化中起决定性作用,一般用可分离目标分子的分子大小范围表示,所能进入层析介质孔内的最大的分子大小称作某种层析介质的上限分子量(大小)或排阻上限,高于此上限的分子全部不能进入层析介质内部,最早被洗脱且不会发生任何相互分离。

 

同理,若分子小到一定程度,可在层析介质所有的内孔中自由扩散,孔的大小不再对其扩散路径长短产生影响,那么这个分子就叫全渗透分子,该分子的大小称作做该层析介质的下限分子量(大小),低于此下限的分子最晚被洗脱且不会发生相互分离。

 

居于分子筛层析介质上限分子量和下限分子量之间的分子大小区间为部分渗透分子,这些不同的分子因为在层析介质孔结构内部的渗透程度不同而产生迁移路径长短和随流动相迁移速度的快慢差异,最终在不同的时间或体积被洗脱,形成相互分离的结果。

 

 常见分子筛层析的应用

分子筛层析应用一般分为两类,即分组式分离(group separation)和高分辨组分拆分(high resolution fractionation)。

分组式分离以一种优选排阻极限的分子筛层析介质,很好的将样品中不同大小的分子,以其排阻极限为界限分为大分子和小分子两组,大于其排阻极限的组分全部无法进入层析介质内部,在死体积附近很快被洗脱,小于排阻极限的组分能进入层析介质内部,其洗脱体积较大,在接近一个柱体积附近被洗脱。此类分子筛层析多用于蛋白样品的脱盐或者换盐,对分子筛层析柱的柱效要求不高,一般使用粒径较大的填料装填较短的柱床,以NW Dex™ G-25 C为例,使用较多的为25-100mm柱床高度。

 

 

高分辨组分拆分往往是在某种分子筛层析介质的分离范围内,按照组分分子大小分离样品各组分,一般用来同时分离多种分子大小的生物分子、单体蛋白,有时也用于分析各种不同大小分子的分子量分布。此类分子筛层析一般对层析柱柱效要求很高,常使用较小粒径的层析介质和使用300到600mm甚至更高的柱床高度。

 

 

 纳微科技NW Super™ 系列分子筛

纳微科技在多年层析介质研发技术的基础上,最新推出了NW Rose™ 4FF,NW Rose™ 6FF,NW Dex™ G-25和NW Super™ 系列分子筛层析介质,尤其是NW Super™系列层析介质和层析预装柱,备受市场关注和认可。

 

NW Super™ 系列高分辨层析介质是以琼脂糖为原料,经高度交联葡聚糖而制成的复合微球,具有亲水、多孔的特性,常用于蛋白质、多糖、核酸等生物样品高分辨率分离纯化,是生物大分子首选的高分辨率分子筛层析介质。

 

现在纳微科技可提供NW Super™ 75,NW Super™ 100,NW Super™ 150和NW Super™ 200四种高分辨分子筛层析介质,后续还会有更多该系列产品推出。

 

NW Super™ 系列层析介质有以下特点:

颗粒均一,分辨率高,柱效高
可在较高流速下达到分离
稳定性高
产率高
放大简单

 

4种NW Super™ 系列层析介质详细参数:

 

4种NW Super™ 层析介质的标准蛋白选择曲线:

 

4种NW Super™层析介质的典型柱效测试图谱:

 

 NW Super™ 系列分子筛层析产品应用数据

应用数据表明,NW Super™ 系列分子筛层析介质对标准蛋白具有较好的分离效果,也能够收获良好的峰形和分离度,相对市面主流分子筛产品,可提供更多排阻范围选择性,是蛋白质、多糖、核酸等生物样品高分辨率分离纯化的不错选择,以下为实际应用数据举例:

 

NW Super™ 75 :

 

NW Super™ 100 :

 

NW Super™ 150 :

 

NW Super™ 200 :

 

 NW Super™ 系列产品订货信息

NW Super™ 系列层析介质可提供不同包装型号的层析介质产品,同时由于高分辨分子筛层析介质一般使用较高的柱床高度,装柱工艺相对复杂,为方便广大纯化工作者使用,我们也提供各种型号的优质层析预装柱产品,直径从8mm到50mm,柱床高度从300mm到600mm。

*仅列出部分产品,更多信息请联系我们。
 

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