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色谱柱的注意事项

色谱柱的注意事项

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  • 发布时间:2021-08-02 15:43
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【概要描述】  色谱柱的正确使用和维护非常重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短其使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,维持色谱柱需要注意以下问题。

色谱柱的注意事项

【概要描述】  色谱柱的正确使用和维护非常重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短其使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,维持色谱柱需要注意以下问题。

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  色谱柱的正确使用和维护非常重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短其使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,维持色谱柱需要注意以下问题。

  ①避免压力和温度的突然变化以及任何机械振动。温度的突然变化或色谱柱从高处坠落都会影响塔内的填充条件;柱压的突然升高或降低也会对柱内填料产生冲击,因此应缓慢调节流速,并在阀门处进样,在阀进样时阀的转动不能过缓。

  ②溶剂的组成要逐渐变化,尤其是反相色谱,不能直接从有机溶剂变成全水,反之亦然。

  ③一般来说,色谱柱不能反冲。只有当制造商表明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则,反冲会迅速降低柱效。

  ④选择合适的流动相(尤其是pH值),避免破坏固定相。有时可以在进样器前面连接一个预柱。分析柱为键合硅胶时,预柱为硅胶,使流动相在进入分析柱前可以用硅胶“饱和”,防止分析柱中的硅胶基质溶解。

  ⑤为避免基质复杂的样品,特别是生物样品直接进柱,需要对样品进行预处理或在进样器和色谱柱之间连接保护柱。保护柱通常是填充有类似固定相的短柱,保护柱可以而且应该经常更换。

  ⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱以除去残留在柱中的杂质。清洗时,流路系统中流动相的更换应逐渐过渡到可混溶的溶剂,每个流动相的体积应为柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。

  ⑦存放色谱柱时,用乙腈或甲醇填充色谱柱,拧紧色谱柱接头,防止溶剂蒸发干燥。切勿将缓冲溶液留在色谱柱中过夜或更长时间。

  ⑧色谱柱 在使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结过滤器堵塞。此时应更换或取出过滤器进行清洗;二是大分子进入柱内,柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,柱头可能塌陷,死体积增加。


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