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第二季:关于高效液相色谱问题,你想知道的都在这了

第二季:关于高效液相色谱问题,你想知道的都在这了

  • 分类:行业资讯
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  • 来源:
  • 发布时间:2017-04-07 00:00
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【概要描述】宽峰原因及解决方法

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【概要描述】宽峰原因及解决方法

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摘自:北京慧德易

宽峰原因及解决方法

1流动相组成变化。解决方法:重新制备新的流动相; 

2流动相流速太低。解决方法:调节流速; 

3漏液(特别是在柱子和检测器之间。)解决方法:检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪音,如果必要更换密封; 

4检测器设定不正确。解决方法:调整设定; 

5柱外效应影响

a、柱子过载。解决方法:小体积进样(例如:10ul而不是100ul)以1:10或1:100的比例稀释样品;

b、检测器对反应时间或池体积响应过大。解决方法:减少响应时间或使用更小的流通池;

c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大。解决方法:使用内径小的短管路;

d、响应时间太长。解决方法:减少响应时间; 

6缓冲液浓度太低。解决方法:增加浓度; 

7保护柱污染或失效。解决方法:更换保护柱;   

8柱入口塌陷。解决方法:打开柱入口,填补塌陷或更换柱子; 

9呈现两个或多个未被完全分离的物质的峰。解决方法:选择其它类型的色谱柱以改善分离效果; 

10柱温过低。解决方法:提高柱温,除非特殊情况,温度不宜超过75℃; 

11检测器时间常数太大。解决方法:使用较小的时间常数。

 

分离度降低原因及解决方法

流动相污染或变质(引起保留时间变化。)解决方法:重新配置流动相; 

保护柱或分析柱阻塞。解决方法:去掉保护柱进行分析,如果必要则更换保护柱,如果分析柱阻塞,可进行反冲,如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏,建议使用恰当的再生程序,如果问题仍然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱柱。

 

所有的峰面积都太小原因及解决方法

1、检测器衰减设定过高。解决方法:减少衰减的设定; 

2、检测器时间常数设定太大。解决方法:设定较小的时间常数;

3、进样量太少。解决方法:增大进样量; 

4、记录仪连接不当。解决方法:使用正确的连接。

 

所有的峰面积都太大原因及解决方法

进样过多。解决方法:减少进样量。

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